Fluoreszenz-Antikörpertechnik zum Nachweis bestimmter Bakterien in einer Probe

Lesen Sie diesen Artikel, um mehr über die Prinzip-Fluoreszenz-Antikörper-Technik zum Nachweis bestimmter Bakterien in einer Probe zu erfahren!

Ziel ist es, das Prinzip der Immunfluoreszenz- oder Fluoreszenz-Antikörpertechnik für den Nachweis bestimmter Bakterien in einer Probe zu erlernen.

Fluoreszenzantikörper- oder Immunfluoreszenztechnik ist ein schnelles und zuverlässiges Verfahren zum Nachweis bestimmter Bakterien in einer Probe. Eine Anzahl von Antikörpern, die mit fluoreszierenden Farbstoffen markiert sind, wie Fluoresceinisocyanat oder Isothiocyanat, die jeweils für bestimmte Bakterien spezifisch sind, sind erhältlich.

Einer dieser markierten Antikörper, der für die bestimmten nachzuweisenden Bakterien spezifisch ist, wird tropfenweise zu einem hitzefixierten Abstrich der unbekannten Bakterienprobe auf einem Objektträger gegeben und leicht über die Oberfläche des Abstrichs verteilt. Ein angefeuchtetes Filterpapier wird in eine Petrischale eingelegt.

Dann wird der Objektträger auf einen U-förmigen Glasstab gelegt und 35 Minuten bei 25 ° C inkubiert. Überschüssiger Antikörper auf dem Abstrich wird mit 1% iger phosphatgepufferter Salzlösung weggespült. Der Objektträger wird bei 25 ° C für 10 Minuten in ein Coplin-Gefäß mit 1% phosphatgepufferter Salzlösung eingetaucht. Das Dia wird mit saugfähigem Papier getrocknet. Ein Tropfen Glycerin wird zum Abstrich hinzugefügt. Es wird mit einem Deckglas abgedeckt und unter einem Fluoreszenzmikroskop untersucht.

Wenn die Bakterien, die für den verwendeten markierten Antikörper spezifisch sind, in der unbekannten Bakterienprobe vorhanden sind, wird ein Antigen-Antikörper-Komplex gebildet (hier sind Bakterien das Antigen). Da der Antikörper mit einer fluoreszierenden Substanz markiert ist, emittiert der Antigen-Antikörper-Komplex Fluoreszenz, wenn er unter einem Fluoreszenzmikroskop beobachtet wird. Wenn für den Antikörper spezifische Bakterien fehlen, wird der fluoreszierende Antikörper weggespült und es wird keine Fluoreszenz beobachtet.